Ovaj dokument navodi ključne korake kvantitativne metode lančane reakcije polimeraze u realnom vremenu (kPCR) za kvantifikaciju zastupljenosti specifičnih molekula mRNK ekstrahovanih iz Daphnia magna. Metoda omogućava identifikaciju molekularnih odgovora na izlaganje potencijalno toksičnim supstancama kroz analizu zastupljenosti specifičnih molekula mRNK. Ovim dokumentom su obuhvaćeni centralni geni uključeni u reproduktivne i toksične reakcije.
Ova metoda omogucćava brzo, robusno i osetljivo otkrivanje molekularnih odgovora i može se koristiti za analizu toksičnih efekata procednih voda iz zemljišta i otpada. Metoda daje informacije o koncentraciji supstance ili test-tečnosti pri kojoj toksični efekti počinju da se javljaju pre posmatranja reproduktivnih ili toksičnih efekata na višim nivoima , što smanjuje potrebu za korišcćenjem bezbednosnih faktora u proceni toksičnosti. Metoda je korisna u nekoliko vrsta procene rizika. U ovom dokumentu, proučavani geni su odgovarajucći za procenu rizika kod recikliranih materijala kao i za klasifikaciju otpada, ali se metoda može prilagoditi drugim vrstama procene rizika uključivanjem drugih gena.
